細(xì)胞和組織的體外培養(yǎng)已成為生命研究和實(shí)踐的不可少內(nèi)容。培養(yǎng)的細(xì)胞類型繁多,從病毒到細(xì)菌和真菌,從人體細(xì)胞到動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞。一些細(xì)胞和組織可在懸浮狀態(tài)下生長(zhǎng),但相當(dāng)一部分哺乳動(dòng)物細(xì)胞需要表面貼壁。
因此,用于提供細(xì)胞體外培養(yǎng)環(huán)境的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板和培養(yǎng)皿除了具有良好的透明度和無(wú)毒、無(wú)菌外,還需經(jīng)表面改性處理使之能夠貼壁、分裂和生長(zhǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)瓶,顧名思義就是用來培養(yǎng)細(xì)胞的。根據(jù)材質(zhì)可以分為玻璃的和塑料的,底部形狀有正方形、長(zhǎng)方形、三角形等,根據(jù)瓶子容積有5至500ml供選擇。 另外,表面經(jīng)過特殊改性處理后,可以讓細(xì)胞更好的進(jìn)行貼壁培養(yǎng),這樣根據(jù)細(xì)胞貼壁面積又可以分為25~175cm2多種。
國(guó)產(chǎn)的細(xì)胞培養(yǎng)瓶一般蓋子都是封閉的,不帶內(nèi)墊,常用于密閉培養(yǎng),可保證其密閉性;進(jìn)口的培養(yǎng)瓶的蓋子樣式比較多:密閉蓋、聚酯蓋、透氣蓋、隔墊蓋等。
密閉蓋的性能和國(guó)產(chǎn)的是相同的,聚酯蓋常用于開放培養(yǎng),只需輕輕旋松瓶蓋便可保證瓶?jī)?nèi)氣體與環(huán)境中氣體的交換。透氣蓋是在瓶蓋中加了0.2μm疏水濾膜,提供無(wú)菌氣體交換,減少污染的風(fēng)險(xiǎn)。
常用于開放培養(yǎng),推薦用于CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng),尤其適用于需要長(zhǎng)期培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)。隔墊蓋是在隔墊上帶有預(yù)切割口,這樣可以使吸嘴(或者5ml以下規(guī)格的移液管)穿插隔墊進(jìn)行加液、吸液或者收獲細(xì)胞,減少污染的機(jī)會(huì),維持培養(yǎng)瓶封閉無(wú)菌的環(huán)境。
細(xì)胞培養(yǎng)瓶的分類:
培養(yǎng)瓶的瓶頸也有多種樣式,有直頸、斜頸、角度頸、三角形、矩形。
直頸:可以減少培養(yǎng)基因晃動(dòng)而流到瓶蓋里;
斜頸:易于傾注,移液管或者細(xì)胞刮容易進(jìn)入瓶體;
角度頸:移液管或者細(xì)胞刮易于進(jìn)入瓶身,并且可減少培養(yǎng)基因晃動(dòng)而流到瓶蓋;
三角形:移液管或細(xì)胞刮更易達(dá)到瓶角,寬底增加穩(wěn)定性;
矩形:斜頸的矩形培養(yǎng)瓶瓶底至瓶頸是一個(gè)坡度設(shè)計(jì),易于傾注,移液管或者細(xì)胞刮容易進(jìn)入瓶體,大部分斜頸瓶都有一個(gè)裙邊以增加穩(wěn)定性。直頸和角度頸的矩形培養(yǎng)瓶整個(gè)瓶底都是培養(yǎng)面,節(jié)省空間并減少培養(yǎng)基因晃動(dòng)而流到瓶蓋。
按細(xì)胞對(duì)產(chǎn)品的貼壁要求分為三類:
普通型適合細(xì)胞和組織的懸浮培養(yǎng);
標(biāo)準(zhǔn)型具有良好的細(xì)胞貼壁性能,適用于細(xì)胞的貼壁生長(zhǎng);
專用型表面含有含氮官能團(tuán),能促進(jìn)某些特殊細(xì)胞(如腫瘤細(xì)胞)的貼壁、生長(zhǎng)和分化。